产品货号：
RFT226
中文名称：
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(兼容去垢剂/还原剂)
英文名称：
产品规格：
1000T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是根据考马斯亮蓝G-250法研制而成，其原理是考马斯亮蓝G-250在酸性条件下和蛋白质结合，使得染料最大吸收峰从465nm变为595nm，在一定的线性范围内，反应液595nm处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比，测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。该产品经过配方优化，兼容一定浓度的还原剂和去垢剂。
每个试剂盒可以检测1000个样品（使用微孔板）或60个样品（使用试管）
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- 检测速度极快，10个样品只需不足10分钟即可完成。
- 灵敏度高，检测浓度下限可达25μg/ml （测定浓度范围在50～1000μg/ml内有较好的线性关系），最小检测蛋白量可达0.5μg。
- 该试剂盒测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度可高达50mM。同时，此方法测定蛋白浓度可以兼容受高浓度的去垢剂影响，可以适用于膜蛋白样品的浓度测定。蛋白样品中SDS浓度低于0.1%，Triton X-100浓度低于1%，Tween 20,60,80浓度低于1%，NP-40浓度低于1%都可以定量。
| 组分 | 规格 | 保存 |
| 考马斯亮蓝G-250 plus染色液 | 200mL | 4℃ |
| BSA标准溶液（5mg/ml） | 2×1mL | -20℃ |
| PBS | 10mL | 4℃ |
每个试剂盒可以检测1000个样品（使用微孔板）或60个样品（使用试管）
- 微孔板测定程序：（工作范围25～1000μg/ml）
- G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀；
- 1mg/ml蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取20μL 5mg/ml BSA蛋白标准溶液，加入80μL PBS溶液，使其终浓度为1mg/ml。
- 按照下表配制BSA标准测定溶液：
编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 1mg/ml BSA标准溶液μl BSA标准溶液μl 0 0.5 1.5 2.5 5.0 7.5 10 15 20 PBS溶液μl 20 19.5 18.5 17.5 15 12.5 10 5 0 BSA终浓度μg/ml 0 25 75 125 250 350 500 750 1000 总体积μl 20μL - 将适当体积的待测样品加入到微孔板中，并用PBS补足到20μL；
- 向微孔板中加入200μL G-250染色液，混匀，室温放置3～5分钟；
- 测定595nm处的吸光值，并记录读数；以不含BSA的样品的光吸收值作为空白对照。
- 以A595为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。
- G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀；
- 试管测定程序：（工作范围25～1000μg/ml）
- G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀；
- 1mg/ml蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取100μL 5mg/ml BSA蛋白标准溶液，加入400μL PBS溶液，使其终浓度为1.0mg/ml。
- 按照下表配制BSA标准测定溶液：
编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 1mg/ml BSA标准溶液μl BSA标准溶液μl 0 2.5 7.5 12.5 25 35 50 75 100 PBS溶液μl 100 97.5 92.5 87.5 75 65 50 25 0 BSA终浓度μg/ml 0 25 75 125 250 350 500 750 1000 总体积μl 100μL - 将适当体积的待测样品加入到试管中，并用PBS补足到100μL；
- 向试管中加入2mL G-250染色液，混匀，室温放置3～5分钟；
- 测定595nm处的吸光值，并记录读数；以不含BSA的样品的光吸收值作为空白对照。
- 以A595为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。
- G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀；
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